北方偉業(yè)計量集團有限公司
| 培養(yǎng)基 | 90%DMEM-H+10%FBS+2mM L-谷氨酰胺 |
| 傳代方法 | 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。 |
| 生長條件 | 37℃；5%CO2+95%空氣； |
| 生長特性 | 貼壁生長 |
| 存儲條件 | 液氮 |
| 類型 | 貼壁生長 |
| 安全等級 | 1 |
| 形態(tài) | 上皮細胞樣，多角形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長 |
| 分離基物 | 胚腎；5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化；女性 |
| 應用領(lǐng)域 | 表達SV40大T抗原，可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細胞；用于瞬時轉(zhuǎn)染時可高表達AP融合蛋白。293細胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系，293T細胞由293細胞派生，同時表達SV40大T抗原，含有SV40復制起始點與啟動子區(qū)的質(zhì)?？梢詮椭?。@2017 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報告 |
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